Карбоксилестерази гомогенатів травних залоз Rapana venosa
dc.contributor.author | Романовська, Ірина Ігорівна | |
dc.contributor.author | Севастьянов, О. В. | |
dc.contributor.author | Шестеренко, Є. А. | |
dc.contributor.author | Крисько, А. А. | |
dc.contributor.author | Шестеренко, Ю. А. | |
dc.contributor.author | Топтіков, Валентин Анатолійович | |
dc.contributor.author | Романовская, Ирина Игоревна | |
dc.contributor.author | Севастьянов, О. В. | |
dc.contributor.author | Шестеренко, Е. А. | |
dc.contributor.author | Крысько, А. А. | |
dc.contributor.author | Шестеренко, Ю. А. | |
dc.contributor.author | Топтиков, Валентин Анатольевич | |
dc.contributor.author | Romanovska, Irina I. | |
dc.contributor.author | Sevastyanov, O. V. | |
dc.contributor.author | Shesterenko, Ye. A. | |
dc.contributor.author | Krysko, A. A. | |
dc.contributor.author | Shesterenko, Yu. A. | |
dc.contributor.author | Toptikov, Valentyn A. | |
dc.date.accessioned | 2018-07-17T09:19:45Z | |
dc.date.available | 2018-07-17T09:19:45Z | |
dc.date.issued | 2018 | |
dc.description.abstract | Вивчити біохімічні і фізико-хімічні властивості карбоксилестераз гомогенатів стравохідної залози і гепатопанкреасу молюска Rapana venosa, особливості енантіоселективного ферментативного гідролізу естеру 3-гідрокси-1,4-бенздіазепін-2-ону, потенційного анксіолітичного і снодійного засобу. Методи: травні залози Rapana venosa гомогенізували і визначали вміст білка за методом Лоурі-Хартрі, естеразну активність за 1- і 2- нафтилацетатами. Ферментативний гідроліз естеру 3-гідрокси-1,4-бенздіазепін-2-ону проводили впродовж 2,5 год в розчині диметилсульфоксиду: Na-фосфатний буфер, 0,0167 М, рН 7,0, в об'ємних співвідношеннях 2:3, при температурі 37 ºC. Визначення енантіомерного надлишку здійснювали за допомогою високоефективної рідинної хроматографії, використовуючи систему SHIMADZU, що оснащена колонкою ChiraDex HR 5μm(4mm×250mm). Результати: Показано, що естеразна активність гомогенатів гепатопанкреасу і стравохідної залози за 2-нафтилацетатом, як субстратом, в 3,6 рази та в 6,7 рази більша, ніж за 1- нафтилацетатом, відповідно. Належність естераз в гомогенатах до родини карбоксилестераз підтверджена повним пригніченням їх активності селективним інгібітором карбоксилестераз ди-(п-нітрофеніл)-фосфатом (2,0 ммоль/дм3). Показано, що pH-оптимуми естеразної активності гомогенатів стравохідної залози і гепатопанкреасу становлять 7,5, і 5,5, відповідно. Встановлено особливості гідролізу естеру 3-гідрокси-1,4-бенздіазепін-2-ону, що каталізується карбоксилестеразами у складі гомогенатів травних залоз Rapana venosa. Показано переважне утворення R-енантіомеру субстрату (енантіомерний надлишок R-енантіомеру становив 42%). Висновки: Виявлена регіоселективність відносно 1-, 2-нафтилацетатів та енантіоселективність карбоксилестераз естеру 3-гідрокси-1,4-бенздіазепін-2-ону. | uk |
dc.description.abstract | Цель. Исследование биохимических и физико-химических свойств карбоксилэстераз гомогенатов пищеводной железы и гепатопанкреаса моллюска Rapana venosa, изучение особенностей энантиоселективного ферментативного гидролиза сложного эфира 3-гидрокси-1,4-бенздиазепин-2-она, потенциального анксиолитического и снотворного средства. Методы. Пищеварительные железы Rapana venosa гомогенизировали для дальнейших исследований и определяли содержание белка по методу Лоури-Хартри, эстеразную активность по 1- і 2- нафтилацетатам. Ферментативный гидролиз сложного эфира 3-гидрокси-1,4-бенздиазепин-2-она, проводили в течение 2,5 ч в растворе диметилсульфоксид: Na-фосфатный буфер, 0,0167 М, рН 7,0, в объемных соотношениях 2:3, при температуре 37 ºC. Определение энантиомерного избытка осуществляли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, используя систему SHIMADZU, оснащенную колонкой ChіraDex HR 5μm (4mm × 250mm). Результаты. Впервые показано, что эстеразная активность гомогенатов гепатопанкреаса и пищеводной железы по 2-нафтилацетату, в качестве субстрата, в 3,6 раза и в 6,7 раза больше, чем по 1-нафтилацетату, соответственно. Принадлежность эстераз в гомогенатах к семейству карбоксилэстераз подтверждена полным подавлением их активности селективным ингибитором карбоксилэстераз ди-(п-нитрофенил)фосфатом (2,0 ммоль/дм3). Показано, что pH-оптимумы эстеразной активности гомогенатов пищеводной железы и гепатопанкреаса составляют 7,5, и 5,5, соответственно. Изучены особенности гидролиза сложного эфира 3-гидрокси-1,4-бенздиазепин-2-она, катализируемого карбоксилэстеразами в составе гомогенатов пищеварительных желез Rapana venosa. Показано преимущественное образование R-энантиомера субстрата (энантиомерный избыток R-энантиомера составил 42 %). Выводы. Выявлена региоселективность относительно 1-, 2-нафтилацетатов и энантиоселективность карбоксилэстераз сложного эфира 3-гидрокси-1,4-бенздиазепин-2-она. | |
dc.description.abstract | Aim. Investigation of biochemical and physico-chemical properties of carboxylesterases in homogenates gland and hepatopancreas of Rapana venosa; study of the features of enantioselective enzymatic hydrolysis of 3-hydroxy-1,4- benzodiasepine-2-one ester, potential anxiolytic and hypnotic drug. Methods. Digestive glands of Rapana venosa were homogenized for subsequent investigations, the protein content in them was determined by the Lowry-Hartree method and esterase activity – according to 1-, 2-naphthyl acetates. Enzymatic hydrolysis of 3-hydroxy-5-phenyl-7-bromo-1,2-dihydro-3H-1,4-benzodiasepine-2-one was conducted for 2,5 h in the solution: dimethyl sulfoxide: Na-phosphate buffer 0,0167 M, pH 7,0 in volume ratio 2:3, at 37 °C. Determination of enantiomeric excess was conducted with help of high performance liquid chromatography in SHIMATSU system, equipped with ChіraDex HR 5μm(4mm×250mm) column. Results. For the first time it was shown, that esterase activity of hepatopancreas and esophageal gland homogenates for 2-naphtyl acetate as substrate, was 3,6- fold and 6,7- fold greater, than for 1-naphtyl acetate, respectively. The belonging of esterases in homogenates to the family of carboxylesterase was confirmed by the total suppression of their activity by the selective carboxylesterase inhibitor, di-(p-nitrophenyl)phosphate (2.0 mmol/dm3). It was shown, that pH-optima of esterase activity in homogenates of esophageal gland and hepatopancreas equals 7,5 and 5,5, respectively. The features of 3-hydroxy-1,4-benzodiazepine2-one ester hydrolysis, catalyzed by carboxylesterase of Rapana venosa digestive glands homogenates were studied. The preferential formation of the R-enantiomer of substrate was shown (enantiomeric excess of R- enantiomer was 42%). Conclusion. The regioselectivity of carboxylesterase to 1-, 2-naphtyl acetates and enantioselectivity of 3-hydroxy-1,4-benzodiazepine-2-one ester were found. | |
dc.identifier | УДК 577.152.34/ 544.478.3 | |
dc.identifier | DOI: http://dx.doi.org/10.18524/2307-4663.2018.2(42).130054 | |
dc.identifier.citation | Мікробіологія і біотехнологія | uk |
dc.identifier.uri | https://dspace.onu.edu.ua/handle/123456789/17867 | |
dc.language.iso | uk | uk |
dc.publisher | Одеський національний університет імені І. І. Мечникова | uk |
dc.relation.ispartofseries | ;№ 2. | |
dc.subject | карбоксилестераза | uk |
dc.subject | травні залози Rapana venosa | uk |
dc.subject | регіоселективність | uk |
dc.subject | енантіоселективність | uk |
dc.subject | карбоксилэстераза | uk |
dc.subject | пищеварительные железы Rapana venosa | uk |
dc.subject | региоселективность | uk |
dc.subject | энантиоселективность | uk |
dc.subject | carboxylesterase | uk |
dc.subject | digestive glands of Rapana venosa | uk |
dc.subject | regioselectivity | uk |
dc.subject | enantioselectivity | uk |
dc.title | Карбоксилестерази гомогенатів травних залоз Rapana venosa | uk |
dc.title.alternative | Карбоксилэстеразы гомогенатов пищеварительних желез Rapana venosa | uk |
dc.title.alternative | Carboxylesterases of Rapana venosa digestive glands homogenates | uk |
dc.type | Article | uk |
Файли
Контейнер файлів
1 - 1 з 1
Ліцензійна угода
1 - 1 з 1
Ескіз недоступний
- Назва:
- license.txt
- Розмір:
- 1.71 KB
- Формат:
- Item-specific license agreed upon to submission
- Опис: