Оптимізація схеми стерилізації експлантів та фітогормонального складу живильного середовища для введення кукурудзи в культуру in vitro
Альтернативна назва
Optimization of explant sterilization protocol and phytohormonal composition of the culture medium for establishment of maize in vitro culture
Вантажиться...
Дата
2025
Науковий керівник
Укладач
Редактор
Назва журналу
ISSN
2076-0558
E-ISSN
2307-4663
Назва тому
Видавець
Одеський національний університет імені І. І. Мечникова
Анотація
Мета роботи: оптимізувати схему стерилізації експлантів з використанням протигрибкових агентів та виявити вплив фітогормонального складу живильного середовища на регенераційні процеси у кукурудзи в культурі in vitro.
Матеріали і методи. На етапі введення насіння кукурудзи в культуру in vitro було протестовано чотири схеми стерилізації з використанням фунгіцидів та без них. Визначали вплив фітогормонів цитокінінового та ауксинового ряду: 6-бензиламінопурину (6-БАП) індолілоцтової кислоти (ІОК) на процеси регенерації кукурудзи в культурі in vitro.
Результати. Виявлено, що найбільший вихід стерильних експлантів у культурі in vitro забезпечила обробка препаратами «Хорус» (85,8%) та «Хінозол» (95,2%). За показником життєздатності проростків та довжиною коренів кращі показники були у варіанті з препаратом «Хорус» (на 15% і 45% більше за контроль відповідно). Встановлено, що середовище MS з ІОК 2 мг/л та 6-БАП 0,5 мг/л найкраще впливало на приживлюваність експлантів (84%), на процеси утворення калусу (47%) та на ризогенез (30%), а на стимуляцію пагоноутворення ‒ MS з 6-БАП 2 мг/л та ІОК 0,5 мг/л.
Висновок. Оптимальною схемою для стерилізації насіння кукурудзи як експлантів для культури in vitro є: промивка мильним розчином (5 хв), промивка проточною водою (5 хв), обробка відбілювачем «Білизна» (NaOCl 10,5 г/л, 15 хв), промивка стерильним дистилятом двічі, обробка препаратом «Хорус» (1,4 г/л, 15 хв), промивка стерильним дистилятом тричі. Встановлено, що кращим для процесів введення в стерильну культуру було живильне середовище MS: зі збільшеним вмістом ауксинів (ІОК 2 мг/л) – для індукування калусів і ризогенезу; цитокінінів (6-БАП 2 мг/л) – для стимуляції органогенезу.
The aim of the study was to optimize the sterilization scheme of explants using antifungal agents and to determine the effect of the phytohormonal composition of the nutrient medium on the stimulation of callus formation and shoot and root proliferation in maize in vitro. Materials and methods. At the stage of introducing maize seeds into in vitro culture, four sterilization schemes with and without fungicides were tested. The effect of cytokinin and auxin phytohormones: 6-benzyl-aminopurine (6-BAP) and indoleacetic acid (IAA) on the regeneration processes of maize in in vitro culture was determined. Results. It was found that the highest yield of sterile explants in in vitro culture was provided by treatment with “Horus” (85.8%) and “Hinozol” (95.2%). In terms of seedling viability and root length, the best results were obtained with Horus (15% and 45% higher than the control, respectively). It was established that the MS medium with 2 mg/l IAA and 0.5 mg/l 6-BAP had the best effect on explant survival (84%), callus formation processes (47%) and rhizogenesis (30%), while MS with 6-BAP 2 mg/l and IAA 0.5 mg/l was best for stimulating shoot formation. Conclusion. The optimal scheme for sterilizing maize seeds as explants for in vitro culture is: washing with soap solution (5 min), washing with running water (5 min), treatment with “Bleach” (NaOCl 10.5 g/l, 15 min), washing with sterile distillate twice, treatment with “Horus” (1.4 g/l, 15 min), washing with sterile distillate three times. It was found that the best medium for introduction into a sterile culture was MS medium: with an increased content of auxins (IAA 2 mg/l) – for inducing callus and rhizogenesis; cytokinins (6-BAP 2 mg/l) – for stimulating organogenesis.
The aim of the study was to optimize the sterilization scheme of explants using antifungal agents and to determine the effect of the phytohormonal composition of the nutrient medium on the stimulation of callus formation and shoot and root proliferation in maize in vitro. Materials and methods. At the stage of introducing maize seeds into in vitro culture, four sterilization schemes with and without fungicides were tested. The effect of cytokinin and auxin phytohormones: 6-benzyl-aminopurine (6-BAP) and indoleacetic acid (IAA) on the regeneration processes of maize in in vitro culture was determined. Results. It was found that the highest yield of sterile explants in in vitro culture was provided by treatment with “Horus” (85.8%) and “Hinozol” (95.2%). In terms of seedling viability and root length, the best results were obtained with Horus (15% and 45% higher than the control, respectively). It was established that the MS medium with 2 mg/l IAA and 0.5 mg/l 6-BAP had the best effect on explant survival (84%), callus formation processes (47%) and rhizogenesis (30%), while MS with 6-BAP 2 mg/l and IAA 0.5 mg/l was best for stimulating shoot formation. Conclusion. The optimal scheme for sterilizing maize seeds as explants for in vitro culture is: washing with soap solution (5 min), washing with running water (5 min), treatment with “Bleach” (NaOCl 10.5 g/l, 15 min), washing with sterile distillate twice, treatment with “Horus” (1.4 g/l, 15 min), washing with sterile distillate three times. It was found that the best medium for introduction into a sterile culture was MS medium: with an increased content of auxins (IAA 2 mg/l) – for inducing callus and rhizogenesis; cytokinins (6-BAP 2 mg/l) – for stimulating organogenesis.
Опис
Ключові слова
стерилізація експлантів, Zea mays L., фітогормони, живильне середовище, культура in vitro, explant sterilization, phytohormones, culture medium, in vitro culture
Бібліографічний опис
Оптимізація схеми стерилізації експлантів та фітогормонального складу живильного середовища для введення кукурудзи в культуру in vitro / Н. І. Теслюк, К. О. Шульга, Т. В. Іваниця, К. Я. Жиловська // Мікробіологія і біотехнологія. – 2025. – № 2(64). – С. 32-46.
УДК
576.64