Optimization of isolation and purification of the bacteriocin from Enterococcus italicus ONU 547 by anion-exchange chromatography
Альтернативна назва
Оптимізація виділення та очистки бактеріоцину Enterococcus italicus ОНУ 547 за допомогою аніонообмінної хроматографії
Вантажиться...
Файли
Дата
2025
Науковий керівник
Укладач
Редактор
Назва журналу
ISSN
2076-0558
E-ISSN
2307-4663
Назва тому
Видавець
Одеський національний університет імені І. І. Мечникова
Анотація
Aim. The aim of the work was to optimize isolation and purification of the bacteriocin from E. italicus ONU 547, which has biotechnological potential by low pressure anion exchange chromatography.
Methods. Anion exchange chromatography by the BioLogic LP system with the cartridge Bio-Scale Mini Macro-Prep High Q was used for isolation of the bacteriocin from the culture liquid and for its partial purification. Two-step and three-step elution protocols were tested in order to increase yield of the bacteriocin and its purity.
Results. The bacteriocin from culture liquid of E. italicus ONU 547 (320 AU/mL) was isolated and partially purified by anion-exchange chromatography with low-pressure system. The slightly alkaline hydrogen potential (pH = 8.0) of culture liquid and mobile phase was suitable for effective binding of the bacteriocin to the column with a positive charged matrix. The two-step (10% and 100% Buffer B with 1 M NaCl) elution procedure resulted in 4.4% yield of the bacteriocin, while three-step elution (10%, 50% and 100%) – 5%. The simplified procedure for bacteriocin isolation and purification is proposed.
Conclusions. Low pressure anion-exchange chromatography with pH 8.0 of the mobile phase is effective for isolation of the bacteriocin directly from culture liquid of E. italicus ONU 547 and for its partial purification. Three-step elution procedure with 10%, 50% and 100% 1M NaCl leads to higher purity and yield of the bacteriocin.
Мета. Метою роботи була оптимізація виділення та очищення бактеріоцину з E. italicus OНУ 547, який має біотехнологічний потенціал, за допомогою аніонообмінної хроматографії низького тиску. Методи. Для виділення бактеріоцину з культуральної рідини та його часткового очищення використовували аніонообмінну хроматографію, що здійснювали за допомогою системи BioLogic LP з картриджем Bio-Scale Mini Macro-Prep High Q. Для збільшення виходу бактеріоцину та його чистоти було випробувано протоколи двох крокової та трьох крокової елюції. Результати. Бактеріоцин з культуральної рідини E. italicus OНУ 547 (320 ВО/мл) було виділено та частково очищено за допомогою аніонообмінної хроматографії з системою низького тиску. Слаболужний водневий потенціал (pH = 8,0) культуральної рідини та рухомої фази був придатним для ефективного зв'язування бактеріоцину з позитивно зарядженим матриксом колонки. Двоступенева процедура елюції (10% та 100% буферу B з 1 M NaCl) призвела до виходу бактеріоцину 4,4%, тоді як триступенева елюція (10%, 50% та 100%) – 5%. Запропоновано спрощену процедуру виділення та очищення бактеріоцинів. Висновки. Аніонообмінна хроматографія низького тиску з pH 8,0 рухомої фази є ефективною для виділення бактеріоцину безпосередньо з культуральної рідини E. italicus ОНУ 547 та для його часткового очищення. Триступенева процедура елюції з 10%, 50% та 100% 1 M NaCl призводить до вищої чистоти та виходу бактеріоцину.
Мета. Метою роботи була оптимізація виділення та очищення бактеріоцину з E. italicus OНУ 547, який має біотехнологічний потенціал, за допомогою аніонообмінної хроматографії низького тиску. Методи. Для виділення бактеріоцину з культуральної рідини та його часткового очищення використовували аніонообмінну хроматографію, що здійснювали за допомогою системи BioLogic LP з картриджем Bio-Scale Mini Macro-Prep High Q. Для збільшення виходу бактеріоцину та його чистоти було випробувано протоколи двох крокової та трьох крокової елюції. Результати. Бактеріоцин з культуральної рідини E. italicus OНУ 547 (320 ВО/мл) було виділено та частково очищено за допомогою аніонообмінної хроматографії з системою низького тиску. Слаболужний водневий потенціал (pH = 8,0) культуральної рідини та рухомої фази був придатним для ефективного зв'язування бактеріоцину з позитивно зарядженим матриксом колонки. Двоступенева процедура елюції (10% та 100% буферу B з 1 M NaCl) призвела до виходу бактеріоцину 4,4%, тоді як триступенева елюція (10%, 50% та 100%) – 5%. Запропоновано спрощену процедуру виділення та очищення бактеріоцинів. Висновки. Аніонообмінна хроматографія низького тиску з pH 8,0 рухомої фази є ефективною для виділення бактеріоцину безпосередньо з культуральної рідини E. italicus ОНУ 547 та для його часткового очищення. Триступенева процедура елюції з 10%, 50% та 100% 1 M NaCl призводить до вищої чистоти та виходу бактеріоцину.
Опис
Ключові слова
bacteriocin, Enterococcus italicus, anion exchange chromatography, peptide purification, бактеріоцин, аніонообмінна хроматографія, очищення пептидів
Бібліографічний опис
Optimization of isolation and purification of the bacteriocin from Enterococcus italicus ONU 547 by anion-exchange chromatography / A. G. Merlich, N. V. Bachynskyi, K. S. Petrenko, G. V. Lisiutin, V. O. Ivanytsia // Мікробіологія і біотехнологія. – 2025. – № 2(64). – С. 6-15.
УДК
602:604:579.6