Перегляд за Автор "Abedalabas, Muchlis"

Зараз показуємо 1 - 3 з 3
  • Ескіз
    Документ
    INFLUENCE OF THE EXOGENOUS QUORUM SENSING AUTOINDUCERS ON PSEUDOMONAS AERUGINOSA RHAMNOLIPIDS BIOSYNTHESIS
    (Одеський національний університет імені І. І. Мечникова, 2013) Abedalabas, Muchlis; Galkin, Mykola B.; Pachomova, E. Yu.; Filipova, Tetiana O.; Абедалабас, Мухліс; Галкін, Микола Борисович; Пахомова, Є. Ю.; Філіпова, Тетяна Олегівна; Абедалабас, Мухлис; Галкин, Николай Борисович; Пахомова, Е. Ю.; Филиппова, Татьяна Олеговна
    The aim of this investigation was to discover the effect of Pseudomonas aeruginosa exogenic QS autoinducers: N-(3-oxo-dodecanoyl)homoserinlacton (3-oxo-CI2-HSL), N-butiryl-homoserinlacton (C4-HSL), and 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolon (PQS) on P. aeruginosa ATCC 15692 mono- and di-rhamnolipids biosynthesis. Methods. Pseudomonas aeruginosa ATCC 15692 were cultured on Giss medium with 2% glucose at 37 °С for 24 h. The investigations were performed in «plancton-biofilm» system with using of «Nunclon» 48-well plates. Di- and monorhamnolipids separation was conducted by TLC methods onAlugram Sil G/UV254 TLC plates. Di- and monorhamnolipids were eluted separately and their content was determined by the orcinic test. Dirhamnolipids /monorhamnolipids ratio was calculated taking a monorhamnolipids content as 1 unit. There were used in this work homoserinlactones (Sigma Aldrich) and 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolon synthesized in ONU Biotechnological scientific- educational center. Results. It was determined that exogenous 3-oxo-C12-HSL showed no effects on rhamnolipids biosynthesis. In presence of the two others autoinducers: C4-HSL and PQS, rhamnolipids content increases. C4-HSL at the concentrations of 5 and 10 цМ caused increasing of the biosurfactants biosynthesis in 3.4 and 4.1 times. In presence of PQS in 40-80 цМ concentration range a proportional increase in the synthesis was observed. Its level increased in 1.9; 3.3 and 5.2 times in presence of 40, 60 and 80 цМ signaling quinolon concentration respectively. After 24 hours of incubation di- and monorhamnolipids ratio was 2,2:1. In presence of C-HSL it was 2:1 at the concentration of this autoinducer 5 цМ and 2,4:1 at the concentration of 10 цМ N-butiryl-homoserinlacton. Conclusions. PQS greatly increased dirhamnolipids biosynthesis, especially Rha-Rha-Cig-Cig. At PQS concentration of40, 60 and 80 цМRha-Rha-Cig-Cig/Rha-Cig-Cigratio was 3:1, 3,6:1 and 4,5:1, respectively. It was shown that supernatants of bacterial cultures, contained increased amounts of dirhamnolipids, showed the highest emulsifying activity.
  • Ескіз
    Документ
    Rhamnolipids biosynthesis in Pseudomonas aeruginosa ONU 301 in the presence of exogenous signaling quinolone
    (Одеський національний університет імені І. І. Мечникова, 2014) Abedalabas, Muchlis; Galkin, Mykola B. ; Filipova, Tetiana O.; Абедалабас, Мухліс; Галкін, Микола Борисович; Філіпова, Тетяна Олегівна; Абедалабас, Мухлис; Галкин, Н. Б.; Филиппова, Татьяна Олеговна
    Discovery of the P. aeruginosa ONU 301 rhamnolipids biosynthesis and rham- nosyltransferase 2 activity in presence of Pseudomonas aeruginosa exogenous quorum sensing signal molecule 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolon (PQS). Methods. Pseudomonas aeruginosa ONU 302 were cultured in the Giss medium with 2% glucose at 37°С 24 h. All discoveries were performed in «plancton-biofilm» system with using of the «Nunclon» 48-well plates. Di- and monorhamnolipids separation conducted by TLC methods and its content was determined by orcinol test. Rhamnosyltransferase 2 (RhlC) activity was analysed in P. aeruginosa cell extracts using a rhamnosyltransferase assay specific for the addition of L-rhamnose to monorhamnolipid. Results. After 16 h of growth, there is approximately 4.2 times more biosurfactant in cultures supplemented with PQS compared with the control. After 24 hours its level in culture medium was 16.0 mg/ml in the presence of 80 pM PQS and 3.7 mg/ml in the absence of PQS. The dirhamnolipids content in control culture after 8 hours was less than the monorhamnolipids. But after 24 hours its level was in 2.86 time higher. The dirhamnolipid/monorhamnolipid ratio increased 24 hours later in 1.25; 1.55 and 2.25 times in presence of40, 60 and 80 pM signaling quinolon concentration, respectively. The additions of PQS at the time ofinoculation are sufficient to induce RhlC activity during the transition to stationary phase. So, after eight hours in the presence of 40, 60 or 80 pM PQS rhamnosyltransferase 2 activity was 1.5, 1.9 and 2.2 times higher as compared with the control. After 24 hours this enzymatic activity was higher at 45%, 85% and 110%, respectively. Conclusion. It is concluded that, Pseudomonas aeruginosa quorum sensing signal molecule 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolon (PQS) can be used in biothechnology to increase the yield of biosurfactants and enrich them with dirhamnolipids
  • Ескіз
    Документ
    ОБРАЗОВАНИЕ БИОПЛЁНКИ И СИНТЕЗ РАМНОЛИПИДОВ PSEUDOMONAS AERUGINOSA АТСС 15692 В ПРИСУТСТВИИ СИГНАЛЬНОГО ХИНОЛОНА И ЕГО СИНТЕТИЧЕСКИХ АНАЛОГОВ
    (Одеський національний університет імені І. І. Мечникова, 2013) Абедалабас, Мухлис; Галкин, Н. Б.; Семенец, Анастасия Сергеевна; Филиппова, Татьяна Олеговна; Абедалабас, Мухліс; Галкін, Микола Борисович; Семенець, Анастасія Сергіївна; Філіпова, Тетяна Олегівна; Abedalabas, Muchlis; Galkin, Mykola B. ; Semenets, A.S.; Filipova, Tetiana O.
    Цель. Оценка влияния екзогенного сигнального хинолона (Pseudomonas Quinolon Signal — PQS) — одного из аутоиндукторов системы quorum sensing у Pseudomonas aeruginosa — и его синтетических аналогов на синтез рамнолипидов. Методы. Клетки Pseudomonas aeruginosa АТСС 15692 инкубировали 24 часа в 48-лунковых планшетах «Nunclon» в присутствии синтетических аналогов 2-гептил-3-гидрокси-4-хинолона (PQS), или его синтетических аналогов (2-октил-, 2-нонил-, или 2-лаурил-3-гидрокси-4-хинолона). Конечные концентрации соединений содержали от 10 до 120 мкМ. Содержание рамнолипидов определяли по реакции с орциновым реактивом. Результаты. Показано, что экзогенный PQS в концентрациях 40, 60 и 80 мкМ вызывает возрастание уровня рамнолипидов в 1,9; 3,3 и 5,2 раза, соответственно. Повышение концентрации сигнального хинолона до 100 и 120 мкМ снижает его стимулирующее действие на 26% и 50% по сравнению с уровнем, который был зарегистрирован при 80 мкМ PQS. При этой концентрации количество планктонных клеток увеличивается в 3,4 раза, а масса биоплёнки вдвое. Активность синтетических аналогов зависит от числа атомов углерода в ацильной цепи; октил-хинолон (С8) > нонил- хинолон (С9) > лаурил-хинолон (Си). Наибольшее повышение уровня биосурфактантов отмечено в присутствии 80 мкМ октил-хинолона — на 65%. Два других аналога увеличивают его на 35% и 20%. Выводы. Оптимальная концентрация сигнального хинолона (PQS), которая максимально повышает синтез рамнолипидов, составляет 80 мкМ. Исследованные синтетические аналоги PQS уступают ему в способности активировать синтез биосурфактантов Pseudomonas aeruginosa.