Выделение и очистка тиаминпирофосфокиназы немалигнизированного миометрия и при наличии в нем опухолей

Abstract

Разработана методика выделения и очистки тиаминпирофосфокиназы, путём последовательного осаждения белка из ткани миометрия сульфатом аммония и последующей гель-хроматографии на сефадексе G-100. Установлено, что немалигнизированная ткань содержит множественные формы фермента, осаждаемые при 20%, 40%, 80% насыщении сульфатом аммония, тогда как тиаминпирофосфокиназа злокачественной и доброкачественной опухолей фракционируется при 40% и 60% насыщении сульфатом аммония.

Розроблена методика виділення та очищення тіамінпірофосфокінази, що складається з послідовного осадження сульфатом амонію і гель-хроматографії на сефадексі G-100. Встановлено, що очищення препаратів досліджуваного ферменту методом гель-хроматографії призводить до збільшення їх питомої активності, коефіцієнту їх очищення. Встановлено, що немалігнізована тканина містить множинні форми ферменту, які осаджуються за умов 20%, 40%, 80% насичення сульфатом амонію, тоді як тіамінпірофосфокіназа злоякісної та доброякісної пухлин фракціонується за умов 40% та 60% насичення сульфатом амонію.

The method of extracting and purification of thiamine pyrophosphokinase which consists of step-by-step ammonium sulfate sedimentation and gel-chromatography on Sefadex G-100 has been elaborated. It has been shown, that purification of the enzyme by the method of gel-chromatography leads to increase of their specific activity, coefficient of their purification. There has been revealed, that non-malignant tissue contains multiple forms of the enzyme, which are precipitated at 20%, 40%, 80% saturation by ammonium sulfate, while thiamine pyrophosphokinase of malignant and benign tumors is fractionated at 40% and 60% saturation by ammonium sulfate.